哪些因素可以影响湿热灭菌的效果？试简述之。

(1)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 哪些因素可以影响湿热灭菌的效果？试简述之。

【◆参考答案◆】：灭菌物体含菌量的影响：含菌量越高，杀死最后一个微生物个体所需时间越长。天然原料含菌量高，化学试剂含菌量少。灭菌锅内空气排除程度的影响：空气排除不净，虽压力增高，但实际温度达不到，不能最后杀死芽孢。灭菌对象的体积：不宜进行大容量培养基的灭菌。灭菌对象的pH值影响：pH6.0～8.0时微生物不易死亡，pH6.0时易死亡。加热与散热速度：灭菌彻底与否与预热速度快慢，灭菌后的散热速度有关，均不宜过快或过慢。

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(2)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 哪些因素可以影响细菌生长曲线中延滞期的长短？

【◆参考答案◆】：除菌种外以下3个因素可影响生长曲线延滞期的长短：①接种龄：如果用对数期接种龄的"种子"接种，则子代培养物的延滞期就短；如以延滞期或衰亡期的"种子"接种，则子代培养物的延滞期就长，如果以稳定期"种子"接种则延滞期居中。②培养基成分：接种到营养丰富的天然培养基要比接种到营养单调的组合培养基中的延滞期短；接种到同种培养基要比接种到它种培养基的延滞期短。③接种量：接种量大，延滞期短，反之则长。

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(3)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 要得到正确的革兰氏染色结果，必须注意哪些操作？哪一步是关键步骤？为什么？

【◆参考答案◆】：应注意如下几点：其一，选用活跃生长期菌种染色，老龄的革兰氏阳性细菌会被染成红色而造成假阴性；其二，涂片不宜过厚，以免脱色不完全造成假阳性；其三，脱色是革兰氏染色是否成功的关键，脱色不够造成假阳性，脱色过度造成假阴性

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(4)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 试分析影响本实验结果的误差来源及提出改进措施？

【◆参考答案◆】：1、仪器误差：所用器材均应清洁干净，并且计数板计数区不应该有擦痕。2、计数室内可能有气泡。因为酵母细胞并没有染色，看起来是透明的，有气泡很容易被计入，使数值偏高；并且，气泡会影响菌悬液的随机分布。改进：若产生气泡，则用吸水纸吸出。3、菌体在计数板上分布不均，当用选取5格计数时，会造成很大误差。改进：应使菌液自然流入并混匀，进行观察时尽可能多数几个格子。4、配制稀释液时吸取的浓度过高或过低，导致稀释液浓度和原液不成正确比例，计算时产生误差。应将原液摇晃均匀后取中部的液体进行稀释。5、由于数菌体数目时视觉疲劳而导致的视觉误差。应多人观察，取记录平均数。6、计数时可能将格四周的菌都计算在内了，使数值偏高。改进：谨遵一个规则，计上不计下，计左不计右，不可以重复计数。7、可能出现有出芽的酵母菌，将出芽的酵母菌按两个计数了，使数值偏高。改进：计数时，只有当芽体于母细胞一样大的时候，才能计为两个。

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(5)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 氧气对专性厌氧菌致死的机理是什么？

【◆参考答案◆】：①厌氧菌因缺乏SOD，因而极易被生物体内产生的超氧化物阴离子自由基（）毒害致死。②超氧阴离子自由基是活性氧的形式之一，含有奇数电子，带负电荷，它既具有分子性质，又有离子性质，反应力极强，性质极不稳定，在细胞内可破坏各种重要的生物高分子和质膜，也可形成其他活性氧化物，对生物体极其有害。③厌氧菌体内因无SOD，故不能将歧化成H2O2。④厌氧菌体内无细胞色素氧化酶，大多数还缺乏过氧化氢酶。⑤在有氧时，厌氧菌无法生活，故易受毒害而致死。

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(6)【◆题库问题◆】：[单选] 呼肠病毒III型对各种因素敏感性的叙述错误的是（）。
A．对热和一般消毒剂的抵抗力不强。
B．能耐乙醚，氯仿和去氧胆酸盐。
C．能耐56℃2小时或70℃30分钟。在37℃的条件下，能存活数天。
D．在20％来苏和l％过氧化物等常用的消毒剂中在室温条件下至少存活1小时。

【◆参考答案◆】：A

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(7)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 试述细菌对磺胺类药物产生耐药性的原因。

【◆参考答案◆】：有的细菌通过突变，改变了二氢叶酸合成酶的性质，合成了一种对磺胺药物不敏感的酶类。这种突变株即使在有磺胺存在的条件下仍能大量合成叶酸；从而获得了抗磺胺的能力并对磺胺产生了耐药性。

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(8)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 何谓石炭酸系数？试举例说明之。

【◆参考答案◆】：所谓石炭酸系数指：在一定时间内被试药物能杀死全部供试菌的最高稀释度与达到同效的石炭酸的最高稀释度的比率。一般规定时间为处理10分钟，供试菌为伤寒沙门氏菌（Salmonellatyphi）。例如：某药剂以1：300的稀释度在10分钟内杀死所有供试菌，而达到同效的石炭酸的最高稀释度为1：100则该药的石炭酸系数

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(9)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 用哪两种方法可以诱导细菌的同步生长？

【◆参考答案◆】：通过环境条件来诱导同步性，如变换温度、光线或向处于稳定期的培养物中添加新鲜培养基。通过物理学方法从随机的不同步细菌群体中选择出同步的群体，一般可采用选择性过滤或梯度离心法。

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(10)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 试述磺胺类药物杀菌的机理。

【◆参考答案◆】：磺胺类药物是细菌生长必需的代谢物对氨基苯甲酸（PABA.的抗代谢物。细菌所必需的PABA可自行合成，也可外源获得，若自行合成则PABA与二氢蝶啶在二氢叶酸合成酶的作用下，合成二氢叶酸，然后再通过二氢叶酸还原酶的作用，生成四氢叶酸。磺胺的结构与PABA极其相似，两者竞争性地与二氢叶酸合成酶结合，阻止或取代了PABA掺入到叶酸分子中去，从而阻断了细菌细胞中重要组分叶酸的合成。叶酸是一种辅酶，在氨基酸、维生素的合成中起重要作用。缺乏此酶，细胞活力受到明显破坏。磺胺抑制细菌的生长是因为许多细菌需要自行合成叶酸生长，而人和动物可利用现成的外源叶酸，故不受磺胺的干扰，所以磺胺类药物可杀灭进入人体的病原细菌。