关于荧光显微镜，下列哪项有误（）

(1)【◆题库问题◆】：[单选] 关于荧光显微镜，下列哪项有误（）
A．其光源通常为高压汞灯或氙灯
B．必须装备为激发滤片和阻断滤片
C．根据光化荧光的原理设计制造的
D．可用于观察固定细胞和活细胞
E．使用时应在较明亮的环境中进行

【◆参考答案◆】：D

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(2)【◆题库问题◆】：[问答题] 简述冰冻蚀刻技术。

【◆参考答案◆】：
冰冻蚀刻技术亦称冰冻断裂。标本置于干冰或液氮中，进行冰冻。然后用冷刀骤然将标本断开，升温后，冰在真空条件下迅即升华，暴露出了断裂面的结构。冰升华暴露出标本内部结构的步骤称为蚀刻。蚀刻后，再向断裂面上喷涂一层蒸气碳和铂。然后将组织溶掉，把金属薄膜剥下来，此膜即为复膜。复膜显示出了标本蚀刻画的形态，可置于电镜下观察。电镜下的影像即代表标本中细胞断裂面处的结构。

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(3)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 细胞融合有那几种方法？病毒诱导与PEG的作用机制有何不同？

【◆参考答案◆】：1）细胞融合的方法有四种：病毒法、聚乙二醇（PEG）法、电激和激光法。2）病毒诱导：是先足够数量的紫外灭活的病毒颗粒黏附在细胞膜上起搭桥作用，使细胞黏着成堆，细胞紧密靠近，同时细胞膜发生了一定的变化，在37℃温浴条件下，粘结部位的细胞膜破坏，形成通道，细胞质流通并融合，病毒颗粒也随之进入细胞。两个细胞合并，细胞发生融合；聚乙二醇（PEG）法：PEG使能改变各种细胞的末结构，使两细胞接触点处质膜的脂类分子发生疏散和重组，利用两细胞接口处双分子层质膜的相互亲何以彼此的表面张力作用，使细胞发生融合。

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(4)【◆题库问题◆】：[问答题] 电镜为何要求一定的真空度？

【◆参考答案◆】：
如果含有很多的其他分子，会与电子发生碰撞，使电子散射，引起眩光，影响成像质量；碰撞也会使电子束不稳定，产生闪烁现象；灼热的灯丝遇气体也易腐蚀和断裂。

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(5)【◆题库问题◆】：[名词解释] cell cloning（细胞克隆）

【◆参考答案◆】：把单个细胞从群体内分离出来单独培养，使之重新繁衍成一个新的细胞群体的培养技术。

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(6)【◆题库问题◆】：[名词解释] 细胞融合

【◆参考答案◆】：
真核细胞通过介导和培养，两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程称为细胞融合（cellfusion）.基因型相同的细胞融合成的杂交细胞称为同核体（homokaryon）；来自不同基因型的杂交细胞则称为异核体（heterokaryon）。

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(7)【◆题库问题◆】：[多选] 关于光镜的使用，下列哪项有误（）
A．用显微镜观察标本时，应双眼同睁，双手并用
B．按从低倍镜到高倍镜再到油镜的顺序进行标本的观察
C．使用油镜时，需在标本上滴上香柏油或液状石蜡
D．使用油镜时，需将聚光器降至最低；光圈关至最小
E．使用油镜时，不可一边在日镜中观察，一边下降镜筒或上升载物台

【◆参考答案◆】：C, D, E

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(8)【◆题库问题◆】：[问答题] 细胞培养应注意哪些问题？

【◆参考答案◆】：
体外培养细胞必须注意三个环节：物质营养、生存环境和废物的排除。
体外培养细胞所需的营养是由培养基提供的。培养基通常含有细胞生长所需的氨基酸、维生素和微量元素。一般培养细胞所用的培养基是合成培养基，它含有细胞生长必需的营养成分：但是在使用合成培养基时需要添加一些天然成分，其中最重要的是血清，以牛血清为主。这是因为血清中含有多种促细胞生长因子和一些生物活性物质。
由于血清中含有一些不明成分，对于特殊目的细胞培养是不利的。为此，研究人员正在探索无血清培养细胞的条件，并已经取得一些进展。由于机体内的细胞生长通常需要不同的细胞因子进行调节，所以，在无血清培养时仍然需要添加必要的因子，包括促细胞生长因子（如EGF.，促贴附物（如层黏连蛋白）和其他活性物质（如转铁蛋白）。无血清培养排除了有血清培养时血清中不明因素的干扰，使实验结果更加可靠。
体外细胞培养必须模拟体内细胞生长的环境。环境因素主要是指无菌环境、合适的温度、一定的渗透压和气体环境。气体主要有两种，即O2和CO2。后者对于维持细胞培养液的酸碱度十分重要。
活体内生长的细胞所产生的代谢物和废物通过一定的系统进行利用和排除。体外培养细胞产生的代谢物和废物积累在培养液中，所以定期更换培养液，对于体外细胞培养也是至关重要的。

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(9)【◆题库问题◆】：[名词解释] cell culture(细胞培养)

【◆参考答案◆】：把机体内的组织取出后经过分散（机械方法或酶消化）为单个细胞，在人工培养的条件下，使其生存、生长、繁殖、传代，观察其生长、繁殖、接触抑制、衰老等生命现象的过程。

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(10)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 何谓免疫荧光技术？可自发荧光的细胞物质是否可在普通显微镜下看到荧光？

【◆参考答案◆】：1）免疫荧光技术是将免疫学方法（抗体同特定抗原专一结合）与荧光标记技术相结合用来研究特异蛋白抗原在细胞内分布、对抗原进行定位测定的技术。它主要包括荧光抗体的制备、标本的处理、免疫染色和观察记录等过程。2）不能。首先，荧光是因一定波长（能量）的光（一般为紫外光）照射到物体后瞬间产生的，作为普通显微镜光源的可见光，其能量不足以使物体产生荧光；其次，所产生荧光的波长要比入射光的要长，即使可以激发出荧光，肉眼也看不到。